貨號(hào)：Y9240L

品名：RNAse Inhibitor（RNA酶抑制劑）

產(chǎn)品描述：

RNA酶抑制劑是一種酸性的52kDa蛋白質(zhì)，它是胰腺型核糖核酸酶如RNase A，RNase B和RNase C的有效非競爭性抑制劑。該酶以豬RNAse抑制劑基因與專有，22.5kDa蛋白質(zhì)標(biāo)簽。

蛋白質(zhì)來源

攜帶豬RNAse抑制劑基因的重組大腸桿菌菌株。

補(bǔ)充：
20 mM Hepes-KOH 
50 mM KCl 
8 mM DTT 
50％甘油
pH 7.5（25°C）

單位定義
一個(gè)單位定義為5ng核糖核酸酶A抑制胞苷2'，3'-環(huán)狀單磷酸水解50％所需的酶量。

質(zhì)量控制分析

單位表征測定
使用1.1倍系列稀釋法測定比活性。在1X RNAse抑制劑反應(yīng)緩沖液中制備酶的稀釋液，并將其加入到含有1mM胞苷2'，3'-環(huán)狀單磷酸酯，1μgRNA酶A的1000μL反應(yīng)物中，該反應(yīng)緩沖液含有100mM Tris-乙酸鹽，1mM EDTA，pH6.5。在5分鐘的反應(yīng)期間以20秒的間隔觀察286nm處的吸光度。

蛋白質(zhì)濃度（OD 280）測量使用使用2.0mg / ml BSA樣品（Pierce Cat＃23209）標(biāo)準(zhǔn)化的Nanodrop ND-1000分光光度計(jì)
在OD 280處分析2.0μL酶樣品并用產(chǎn)品儲(chǔ)存溶液沖切。使用消光系數(shù)59,600和分子量74,828道爾頓將觀察到的3個(gè)重復(fù)樣品的平均測量值轉(zhuǎn)化為mg / mL。

SDS-Page（物理純度評(píng)估）
將2.0μL濃縮的酶溶液加載到變性的4-20％Tris-甘氨酸SDS-PAGE凝膠上，該凝膠側(cè)翼為寬范圍的MW標(biāo)記和2.0μL的樣品的1:100稀釋物。電泳后，將凝膠染色并比較??樣品以確定物理純度。該測試的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)要求濃縮樣品中污染帶的總量不超過稀釋樣品中目的蛋白質(zhì)條帶的質(zhì)量，確認(rèn)濃縮樣品的純度大于99％。

污染測試

單鏈核酸外切酶活性
將含有10,000cpm放射性標(biāo)記的單鏈DNA底物和10μL酶溶液的50μl反應(yīng)液在37℃下孵育4小時(shí)，導(dǎo)致TCA可溶性計(jì)數(shù)的釋放少于5.0％。

雙鏈核酸外切酶活性將含有5,000cpm放射性標(biāo)記的雙鏈DNA底物和10μL酶溶液的50μl反應(yīng)液在37℃下溫育4小時(shí)，導(dǎo)致TCA可溶性計(jì)數(shù)的釋放少于1.0％。

雙鏈核酸內(nèi)切酶活性將含有0.5μgpBR322 DNA和10μL酶溶液的50μL反應(yīng)物在37℃下溫育4小時(shí)，結(jié)果通過瓊脂糖凝膠電泳確定沒有肉眼可察覺地轉(zhuǎn)化為帶切口的環(huán)狀DNA。

使用RNAse Alert kit（Integrated DNA Technologies），按照制造商的指導(dǎo)原則，篩選非特異性RNAse測定產(chǎn)物的非特異性RNA酶污染。

大腸桿菌 16S rDNA污染測試
重復(fù)5μL酶溶液樣品變性，并在TaqMan qPCR測定中篩選污染性大腸桿菌基因組DNA，使用對(duì)應(yīng)于16S rRNA基因座的寡核苷酸引物。測試的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)是由3個(gè)重復(fù)的無模板對(duì)照樣品的平均值產(chǎn)生的閾值循環(huán)計(jì)數(shù)（C t）。基于無模板對(duì)照 Ct值與標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)之間的相關(guān)性，該測定的檢測限為<10拷貝基因組/樣品。

部分產(chǎn)品信息：

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