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Guanosine-3',5'-bisdiphosphate - (N-6001)

ppGpp, Magic Spot, Guanosine tetraphosphate

鳥苷3'，5'-雙二磷酸-（N-6001）

ppGpp，魔點，鳥苷四磷酸

->

描述

）特別地，ppGpp強烈抑制翻譯機制的成分如tRNA和rRNA的合成（Paul，BJ，et al。，Gralla，JD，et al。），同時刺激氨基酸生物合成相關基因的轉錄（ Artimovitch，I.等）。這種ppGpp介導的機制可防止不必要的能源外流，以幫助細菌生存直至達到足夠的氨基酸水平。ppGpp鳥苷四磷酸的合成是在嚴格的響應機制下由ATP和GDP合成的（圖1）。RelA和SpoT蛋白在維持適當的ppGpp水平中起著關鍵作用（綜述于（Potrykus，K.，et al。））。合成后，ppGpp轉錄因子與RNA聚合酶結合（Vrentas，CE等，）調節某些啟動子的轉錄，該過程在大腸桿菌中受蛋白質DksA輔助，圖2（Paul，BJ等）。在存在ppGpp的情況下，tRNA和rRNA的合成會減少，有利于氨基酸生物合成基因的轉錄。盡管人們了解了ppGpp的作用，但尚未*闡明ppGpp參與某些啟動子調控的機制，并且在不同細菌之間存在差異（Bernardo，LM等）。ppGpp的分子機制仍在研究中，以更好地發揮作用。通過嚴格的響應了解不同細菌如何適應環境。嚴格的響應盡管ppGpp在體內細胞存活中起著至關重要的作用，通過體外實驗，有幾個小組對我們目前有關四磷酸鳥苷如何與RNA聚合酶和其他轉錄因子相互作用的知識做出了貢獻（Lemke，JJ，Vrentas，CE，Powell，BS，deLivron，MA等）。著名的是，威斯康星大學的理查德·古斯（Richard Gourse）的實驗室致力于了解RNA轉錄調控以及ppGpp在調節對變化的環境條件的響應中所起的作用。Paul et al。（2003）描述了一種很好表征的轉錄測定法，以檢查添加的ppGpp濃度對體外轉錄過程中啟動子活性的影響。在本文中，我們提供了一些通用指導原則，可以在其中改變ppGpp數量以評估其對細胞嚴格反應的影響的任何體外轉錄測定中遵循。* Potrykus和Cashel指出，從大腸桿菌提取物中的放射自顯影照片中出現了兩個斑點，這些斑點與氨基酸饑餓的壓力有關。俄亥俄州立大學的伊琳娜·阿蒂西莫維奇（Irina Artsimovitch）稱，這些斑點被標記為“魔術”，因為“微生物學家半個世紀以來一直在想，這種結構相對簡單的小分子如何對調節細胞的存活產生如此深遠的影響。” 使用ppGpp進行體外轉錄測定的基本實驗參數：該測定法是研究ppGpp的細胞代謝方面的基本工具，這些方面對養分利用率的變化非常敏感，Schneider等人介紹了Gourse博士的基本方法之一。涉及制備將適當的反應緩沖液，DNA模板（超螺旋質?；蚓€性）結合的反應混合物，NTP的不平衡池（UTP的濃度非常低），以及存在或不存在ppGpp時感興趣的RNA聚合酶。然后將轉錄反應在適當的溫度和適當的溫度下孵育，使用EDTA和甲酰胺溶液淬滅，然后通過聚丙烯酰胺凝膠電泳進行分析，以確定轉錄產量。在Krásný和Gourse，Vrentras等人，Paul等人，Carmona等人和Bernardo等人中也描述了此協議的其他顯著變化。注意：應包括含有緩沖液而不是ppGpp的對照反應。注意：必須為每個特定的啟動子優化鹽濃度（KCl或NaCl）。在高鹽濃度下，ppGpp的作用更為明顯（Potrykus，K.等）。” 我與之打交道的人一直都是專業人士，并且對產品有很好的工作知識。您提供的產品無法通過其他任何來源（ppGpp）獲得。我有一個小型實驗室，即使我們可以自己制作化合物，也不必專門找人制作化合物來加快我的研究工作。我認為你很棒---真的!!!“維多利亞·羅賓遜康涅狄格大學副教授

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