將抗 MuLV p30單克隆包被抗體吸附到微量滴定板上。樣品或標準品中存在的MuLV核心抗原 ( p30 ) 與吸附在板上的抗體結合；添加抗MuLV p30 多克隆抗體并與第一抗體捕獲的抗原結合。

在孵育和洗滌步驟之后，添加HRP 偶聯的二抗并與抗 MuLV p30 多克隆抗體結合。在洗滌步驟中去除未結合的HRP偶聯二抗，并將與HRP反應的底物溶液添加到孔中。

與樣品中存在的MuLV核心抗原的量成比例地形成有色產物。通過添加酸終止反應并在 450 nm 處測量吸光度。從重組MuLV p30核心抗原制備標準曲線，然后確定樣品濃度。