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mblbio TS-0010-1C說明書

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mblbio TS-0010-1C說明書


背景


T淋巴細胞在免疫系統(tǒng)中起著核心作用。通過檢測各種細胞表面來測量總T細胞和T細胞亞群計數


分子。CD8+抗原特異性T細胞的計數需要I類MHC/肽復合物對T細胞受體(TCR)的同源識別。


這可以使用T-Select MHC I類四聚體來實現,該四聚體由四個MHC I級分子組成與熒光蛋白綴合。因此,T-Select MHC四聚體測定允許對與特定MHC分子復合的給定肽特異性的總T細胞群進行定量。此外,由于結合不依賴于功能途徑


群體包括與功能狀態(tài)無關的特異性CD8+T細胞。可以在全血或分離的淋巴細胞/單核細胞制劑中進行測量。在一些頻率較低的情況下,可能需要進行體外細胞擴增。




染色是通過將樣品與T-Select MHC四聚體試劑孵育,然后洗去過量的四聚體來完成的。然后通過流式細胞術測定四聚體陽性淋巴細胞的數量。


該四聚體試劑包含人類I類HLA-A*02:01和來源于CMV pp65結構蛋白的表位肽,并且它可以通過流式細胞術檢測HLA-A*02:01限制性CMV pp65-特異性CD8+T細胞。




巨細胞病毒(CMV/HHV-5)是一種廣泛傳播的皰疹病毒,無癥狀感染大多數人。健康個體中的CMV特異性T細胞在控制CMV再激活中起著重要作用。然而,免疫功能受損個體的巨細胞病毒感染是感染發(fā)病率和死亡率的主要原因,尤其是在移植受者和感染人類免疫缺陷病毒(HIV)的人群中。CMV特異性T細胞的再生與對CMV疾病的保護之間的相關性已在接受同種異體骨移植的患者中得到證實


骨髓移植(BMT)。供體來源的CMV特異性T細胞的過繼轉移導致BMT患者的病毒特異性免疫恢復,同時降低了病毒再激活率。使用MHC四聚體監(jiān)測CMV特異性T細胞可用于預測有復發(fā)或持續(xù)性CMV感染、CMV疾病或移植相關死亡率風險的患者。


HLA限制


HLA-A*02:01


CTL表位CMV pp65(495-503個氨基酸,NLVPMVATV)的起源和序列


試劑


500?L液體-10?L/測試


將四聚體溶解在水性緩沖液中


含有0.5mM EDTA、0.2%BSA、10mM Tris-HCl


(pH 8.0)、150mM NaCl和0.09%NaN3。


共軛物


TS-0010-1C


鏈霉親和素藻紅蛋白(SA-PE)


486-580 nm激發(fā)


發(fā)射波長為586-590 nm


TS-0010-2C


鏈親和素-別藻藍蛋白(SA-APC)


633-635 nm激發(fā)


發(fā)射波長為660-680 nm


儲存條件


儲存溫度為2至8°C。不要凍結。盡量減少曝光。小瓶標簽上注明了有效期。



Code No. TS-0010-1C




ClassClass IAnimal speciesHuman
Categoryvirus
ConjugatePE
Immunogen (Antigen)CMV pp65
SequenceNLVPMVATV
MHC AlleleA*02:01




Citations
  1. Watanabe K, et al., CD137-guided isolation and expansion of antigen-specific CD8 cells for potential use in adoptive immunotherapy. Int J Hematol. 88: 311?|320 (2008)(PMID:18677654)

  1. Sabouri AH, et al., Impaired function of human T-lymphotropic virus type 1 (HTLV-1)-specific CD8+ T cells in HTLV-1-associated neurologic disease. Blood 112: 2411?|2420 (2008)(PMID:18502825)

Product category
  • Research area

  • Immunology

  • Tools

  • MHC tetramer






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